自从我们的开始以来病毒服务在2016年,我们在我们的现成病毒载体库存中增加了许多新的工具。188完整比分直播以下是我们在过去几个月发布的一些AAV和慢病毒准备:
- 表达SARS-COV-2蛋白的慢病毒制备方法
- 针对目标表达的CHR2
- 诈骗者
- GFP依赖CRE和FLPO
- 和更多!
新的慢动动力制作准备
SARS-COV-2蛋白表达
克罗根实验室很快就分享了表达SARS-CoV-2蛋白的质粒在4月初。现在,我们将一些最具要求的质粒转化为熊viral准备,以进一步加速Covid-19研究。以下Lentiviral Preps现在可用:
- pLVX-EF1alpha-SARS-CoV-2-N-2xStrep-IRES-Puro:SARS-COV-2 N蛋白的表达
- PLVX-EF1ALPHA-SARS-COV-2-M-2XSTREP-IRES-PURO: SARS-CoV-2 M蛋白的表达
- pLVX-EF1alpha-SARS-CoV-2-orf3a-2xStrep-IRES-Puro:SARS-COV-2 ORF3A的表达
表达E蛋白的慢病毒制备方法(PLVX-EF1ALPHA-SARS-COV-2-E-2xstrep-IRES-PURO)和nsp2(PLVX-EF1ALPHA-SARS-COV-2-NSP2-2XSTREP-IRES-PURO)也在进行中,应该会在未来几周可用。
Crispri合并图书馆
Dolcetto池库现在可以作为慢动动力准备。它是一种抑制超过18,000名人类基因的人类扼杀病例,用于基因组抑制筛选。
控制AAV
控制AAV使研究人员不仅可以解释他们的结果,还可以确认靶细胞中的表达。虽然各种AAV血清型可以获得不同的表达模式,但研究人员往往需要为自己的实验经验确定这些转导模式。为此目的,我们提供控制AAV在较小的aliquots的20ul血清型测试帮助您为您的实验挑选最佳的AAV。Addgene病毒服务现在已经扩展到提供许多新的血清型的对照质粒,以及一个新的Cre依赖的GFP对照质粒,用于前脑gaba能中间神经元的表达(83895)。
质粒 | 血清型 | 姓名 | 储户 |
27056 | AAVrg | Paav-EF1A-DIO EYFP | Karl Deisseroth. |
11447 | AAV5 | Paav-EF1A-FDIO MCHERRY | Karl Deisseroth. |
112677 | AAV2. | Pottc1032 - Paav Ef1a Nuc-Flox(MCHerry)-EGFP | Brandon Harvey |
50457 | AAV2. | pAAV-hSyn-DIO-EGFP | 布莱恩罗斯 |
50459. | AAV1 | pAAV-hSyn-DIO-mCherry | 布莱恩罗斯 |
50457 | AAV1 | pAAV-hSyn-DIO-EGFP | 布莱恩罗斯 |
114472 | AAVrg | Paav-hsyn-mcherry | Karl Deisseroth. |
83895 | AAVrg | pAAV-hDlx-Flex-GFP-Fishell_6 | 戈登Fishell |
Optimetics.
Optimetics.继续提供神经科学,并更有高效的光明介导的神经元控制工具。Optimetics的优点位于系统提供的时尚控制中,允许特定于神经元的操纵。我们已经扩展了我们的AAV集合,包括两个新的CHR2构造,允许有针对性的表达式。质粒75470现在可以在AAV1中获得,用于与MCHERRY报告者结合的CHR2(H134R)的FLP依赖性表达。我们现在还提供质粒83898的AAVRG,其将CHR2的表达通过MDLX增强子元素靶向棕褐色GAB-ERGIC中间核。
质粒 | 血清型 | 姓名 | 储户 |
75470 | AAV1 | pAAV-CAG-FLEXFRT-ChR2 -mCherry (H134R) | Connie Cepko. |
83898 | AAVrg | Paav-MDLX-CHR2-MCHERRY-FISHELL-3 | 戈登Fishell |
Chemogenetics
化学遗传学提供了控制细胞活动的非侵入性方法,特别是在大脑中,并在未来治疗的发展中有希望。我们的流行质粒编码一个Cre依赖版本的DREADD hM3D现在也提供AAV1(连同AAV PHP。eB, AAV逆行,AAV2, AAV5, AAV8, AAV9)。一旦被激活,DREADD通过Gq通路进行活动,并促进神经元放电。
质粒 | 血清型 | 姓名 | 储户 |
44361 | AAV1 | Paav-hsyn-dio-hm3d(gq)-mcherry | 布莱恩罗斯 |
重组酶
重组酶系统如CRE-LOX允许更准确的细胞和组织靶向。虽然启动子和AAV血清型有时可用于靶向组织类型,但重组酶允许您进一步将基因表达限制于重组酶和构建体的区域。来自Cepko Lab的三种新的重组酶现在可作为AAV1提供。CRE-DOG构造69570和69571一起分别编码GFP依赖CRE的N和C终端段。两段在GFP存在下聚集在一起,形成诱导LOX位点的重组的功能性CRE酶。该系统利用了提供各种GFP表达模式的转基因报告系的广泛供应,从而允许您进一步将基因活化物限制为表达CRE和GFP的细胞。GFP依赖性FLPO,FLP-DOG(75469)也可在AAV1中获得。
质粒 | 血清型 | 姓名 | 储户 |
69570. | AAV1 | Paav-EF1A-N-CRETRCINTG | Connie Cepko. |
69571 | AAV1 | pAAV-EF1a-C-CreintG | Connie Cepko. |
75469 | AAV1 | Paav-EF1A-FLP-DOG-NW | Connie Cepko. |
188完整比分直播病毒载体即将推出!
以下列出的这些载体应在未来6个月内在Addgene发布,等待质量控制。有关可用日期的估计或特定目录产品何时可订购的通知,请将您想要通知的病媒名称和血清型发送电子邮件至help@addgene.org。
Chemogenetics
质粒 | 血清型 | 姓名 |
44362 | AAV1 | pAAV-hSyn-DIO-hM4D -mCherry (Gi) |
83896 | AAVrg | pAAV-hDlx-GiDREADD-dTomato-Fishell-5 |
83897 | AAVrg | Paav-HDLX-GQDREADD-DTOMATO-FISHELL-4 |
控制
质粒 | 血清型 | 姓名 |
114471 | AAV2. | Paav-EF1A-FDIO MCHERRY |
83900 | AAVrg | Paav-MDLX-GFP-Fishell-1 |
生物传感器
质粒 | 血清型 | 姓名 |
83899 | AAVrg | pAAV-mDlx-GCaMP6f-Fishell-2 |
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