俗话说:“不制定计划就是计划失败。”准备是任何实验的关键一步,可以帮助防止未来的头痛。来帮助你计划PEI转染用于AAV包装,考虑使用这裴计算器.AAV包装通常需要以特定的摩尔比转染三个质粒。为了得到正确的比率,你需要做一些计算。这个计算器可以为你做数学和简单的调整类型的组织培养皿和使用的皿数。这里是让AAV包装更容易一点!
使用PEI转染计算器进行AAV包装
- 选择你想用于AAV包装转染的质粒摩尔比。在我的实验室,我们经常使用以下比率:
- 1转移质粒:1 pHelper: 1 RepCap OR
- 3转移质粒:5 pHelper: 2 RepCap
- 选择要进行转染的组织培养皿类型:
- 15厘米的盘子或
- CF5栈
- 选择你计划转移的盘子或栈数:
- 1到10
- 在电子表格中填写实验细节:
- 命名你的病毒准备
- 输入您计划使用的质粒的具体名称
- 输入这些质粒的碱基对大小
- 输入质粒浓度
电子表格将计算以下内容
- 每盘或一叠质粒所需的质量分数。计算的基础是每15厘米培养皿使用28 μg总质粒(Transfer, helper和RepCap加在一起)或每CF5堆栈使用2500 μg质粒。
- 整个实验所需每个质粒的总ug
- 整个实验所需质粒的总体积(μL)
这是计算器用来计算每个质粒所需μl的公式。在计算器电子表格中,方程的每一部分都有相应的列:
我们希望这个计算器将使它更容易计划您的AAV包装实验。请在下面的评论区告诉我们你对这个计算器的看法。
参考文献
1.蔡志强,王志强,等。“体外和体内使用重组腺病毒相关病毒载体的生产”。188完整比分直播分子生物学的当前协议第16 - 25(2007):。PubMedPMID: 18265393.
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