您是否曾在模型系统中选择性地杀死一部分细胞的子集？事实证明，用光诱导的光敏剂和适当的颜色光的快速ZAP，你可以做到这一点。光敏染料和蛋白质已经存在一段时间（退房这述评），但是布鲁克斯和曾荫权Labs最近开发了由蛋白质复合物复合物和Mg-2I-DL5 **氟因物组成的光敏剂，其可用于培养细胞和培养物中体内．继续阅读，了解更多关于这个杀手照明技术!
什么是光敏剂?
首先，给出几个定义。一个光敏剂是一种吸收光产生活性氧的染料或蛋白质。光敏剂产生的活性氧使靶蛋白或细胞失活，而对邻近细胞几乎没有影响。本研究中使用的光敏剂由两部分组成:1)可激活蛋白(FAP -荧光素激活蛋白- dL5**在本例中)和2)荧光素(TAP靶向激活光敏剂- MG-2I在本例中)。直到与蛋白质伴侣结合形成完整的FAP-TAP复合物(MG-2I-dL5**)，荧光素才会发光。FAP- tap复合物在特定波长的光激发下会发光，也会产生ROS，通过FAP的局部表达实现ROS靶向细胞消融。
新的光敏剂：FAP-TAP MG-2I-DL5 **
MG-2I-DL5 **是一个新的FAP抽头复合体，其中DL5 **是FAP。它的工作是结合Mg-2i，是光敏剂荧光染料。Mg-2i是复合物的敲击部分，衍生自孔雀石绿色（Mg）染料，但是通过添加两个碘残基进行了改性。与Mg相比，MG-2I在DL5 ** FAP绑定时增加了ROS生成。碘修饰还将Mg-2i的激发波长移至666nm，其在近红外（NIR）光谱（> 620nm）内。以上是MG-2I-DL5 ** FAP抽头系统的工作方式的简要示意图。
MG-2I-dL5光诱导的细胞消融
He等人用MG-2I-dL5**在两个不同的实验环境下测试了光诱导的细胞消融:HEK293细胞培养和在斑马鱼生活。在细胞培养实验中，只有表达dL5**的细胞经MG-2I染色和光照处理后，暴露30分钟内死亡。90秒的光照足以100%有效杀灭dL5**细胞，且邻近的旁观者野生型细胞不死亡。
用胚胎和成人鱼进行Mg-2I-DL5 **的斑马鱼实验。斑马鱼是这些实验的理想模型生物，因为开发胚胎是透明的，因此很容易实时观看发展。在这两种情况下，DL5 **用Mcorulean3（Mcor3）标记，用于可视化，并从特异性启动子表达。通过在Mg-2I溶液中孵育胚胎，或用染料注入成人鱼，用Mg-2i标记。暴露于仅12分钟的照明的胚胎在其心脏后24小时内具有更少的Mcor3标记的细胞，并且治疗后96小时没有Mcor3细胞（见图2）。诱导细胞死亡通过TUNEL染色证实。下面的视频显示了斑马鱼的心跳和血液循环后发生的事情发生了以下的FAP抽头光激活。
视频：https://www.youtube.com/watch?v=xOtH5bs4HiI
MG-2I-DL5 **在其他光敏剂上的优点
MG-2I-dL5**相对于其他基因编码光敏剂的主要优势之一是它能与近红外光一起工作。近红外波长比短波有更好的组织穿透能力，这使得它有可能做类似的事情体内成像。与NIR光的激发也产生较少的非特异性RO，因为NIR光不会激发细胞中发现的天然生物发色团。He等人还表明MG-2I-DL5 **仅在暴露于YFP和RFP激发波长时产生少量的非特异性ROS，这表明它可以与这些荧光蛋白一起使用。金宝搏app下载
他等人还将MG-2I-dL5**与MG-2I-dL5**进行了正面比较杀手这是一种基因编码的红色荧光光敏剂蛋白，在绿光照射下会产生ROS。他们发现KillerRed需要更长的曝光时间(5分钟vs 10秒)才能达到与Mg-2I-dL5**相同的杀戮水平。Mg-2I-dL5**也比KillerRed具有更高的光稳定性，仅在曝光1分钟后KillerRed就能达到75%以上的光漂白。MG-2I-dL5**在长时间曝光后出现轻微漂白。此外，KillerRed需要线粒体靶向来提高细胞消融效率，但dL5**光毒性在细胞表面、细胞质、线粒体或细胞核中表达时被诱导。这两种光敏剂对邻近细胞的脱靶损伤率相似。
博士TL;MG-2I-dL5**是一种近红外光敏剂，允许精确的基于光的蛋白质失活/细胞消融控制，同时对旁观者细胞有有限的附带损害。你准备好使用MG-2I-dL5**进行研究了吗?请在下面的评论中告诉我们你使用光敏剂的经验!
参考
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