我们一直在更新我们的网站质粒验证过程使您更容易在存储库中找到所需内容,但我们也使您比以往任何时候都更容易使用Addgene进行存储质粒沉积过程可分为三个简单步骤:
- 向Addgene发送质粒信息
- 材料转让协议批准(MTA)
- 将质粒发送到Addgene和质量控制
第2步和第3步通常非常简单-我们的技术转移团队将直接与贵校沟通,以确保MTA得到处理,一旦我们获得了您的所有质粒数据,我们将向您发送预付运费的运输材料(即沉积设备),并说明如何将质粒上的液体DNA或细菌条纹传回给我们。如果在QC过程中出现任何问题,我们的科学家将与您联系。作为存放的科学家,你将最参与第一步,虽然数据输入可能是一件繁琐的事情,但我们已经使用存放电子表格将您的质粒信息发送给我们比以往任何时候都更容易。
数据输入过程
上Addgene主页,如果你滚动到页面顶部的“沉积质粒”选项卡,点击开始存款,“您将看到有三个数据输入选项(请参见右侧的图像)。前两个选项将带您进入我们的在线数据输入流程。可以找到有关此过程的详细指南在这里.
第三种选择-存款电子表格-相对较新,但正在受到欢迎,而且有充分的理由。如果你要储存15个或更多的质粒,这是最快的选择。只需下载电子表格,您的存储中的每个质粒将得到一行,您将输入所有必要的质粒信息,如列标题所示(必需的列在电子表格中以红色显示,并在下表中描述)。一些单元格有下拉选项供您选择,而其他单元格需要用简短的回答文本填充。您还可以直接将序列数据粘贴到适当的完整和部分序列单元格中。
填写并发送存款电子表格
电子表格使输入具有相同主干的一组质粒的信息变得非常容易——您只需将任何重复的信息复制并粘贴到适当的行中即可。
如果你有关于什么应该进入一个单元格的问题,把鼠标悬停在单元格上,说明就会弹出。如果您计划提交超过50个质粒或有其他问题,请联系help@addgene.org.
填写完电子表格后,将其保存为以下格式:
labname\u addgene\u batch\u upload.xls
将labname替换为PI的名称,并将电子表格发送到deposit@addgene.org与任何相关的质粒地图和序列文件在任何格式以及您的首选送货地址。从那里,我们将使用电子表格中的信息生成质粒页面,我们将发送给你审查。我们还会寄给你一个储存包,你可以用它把物理质粒寄回给我们。
我们希望存款电子表格将大大加快您的数据输入过程,并比以往任何时候都更容易与科学界共享您的质粒。
栏目标题 | 描述 |
质粒名称 | 在出版物中出现的质粒或在实验室中通常被称为质粒的名称 |
质粒类型 | 选择:编码一个插入、编码gRNA/shRNA或空主干 |
目的 | 回答"这个质粒是做什么的?,小于200个字符 |
基因或插入物的种类 | 从智人、鼠、褐家鼠、鸡、牛、蛙、斑马鱼、黑腹果蝇、线虫、酿酒酵母、裂殖酵母、芥菜、合成或其他植物中选择。如果是其他物种,则可在单独的列中指出。 |
相关的突变 | 在基因/插入中输入任何突变。如果WT,则将此空。 |
主向量类型 | 选择从哺乳动物表达,细菌表达,慢病毒,逆转录病毒,AAV, RNAi,荧光素酶,cre/lox,酵母表达,蠕虫表达,植物表达,小鼠靶向,CRISPR, TALEN,合成生物学,未指定,或其他 |
克隆方法 | 从限制性内切酶、拓扑异构酶克隆、网关克隆、非连接克隆、吉布森克隆或未知克隆中选择 |
细菌耐药性 | 输入质粒中编码的细菌抗生素耐药性。选择:氨苄西林、卡那霉素、氯霉素、四环素、大观霉素、潮霉素、博来霉素(佐霉素)、庆大霉素、链霉素、诺霉素(clonNat)、上述组合或其他 |
高复制或低复制 | 从高或低拷贝中选择。选择“高拷贝”,如果从微量准备产生足够数量的DNA,选择“低拷贝”,如果需要特殊的生长条件或质粒很难生长。 |
生长温度 | 选择30摄氏度、37摄氏度或室温。 |
经济增长压力 | 选择addgene应用于分配该质粒的菌株。选择:DH5alpha、NEB稳定、ccdB存活或其他 |
危险的 | 如果质粒会在细菌中产生任何对人类危险或有毒的物质,请在下拉框中选择“是”,并联系Addgene |
专利或许可证 | 如果有任何专利或许可证禁止Addgene分发质粒,请从下拉列表中选择“是”,然后联系Addgene。 |
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