单菌落裸奔:条纹板挑战

由詹妮弗曾

詹妮弗曾

对单个菌落裸奔是任何细菌学家技能组合中不可或缺的一部分。所以,当戴夫Westenberg在他的微生物实验室课程中教授这个概念时,他决定增加一点乐趣。他混在一起10 .大肠杆菌产生不同色素,并让学生们用划线板技术从每个菌株中分离菌落。

韦斯滕伯格是密苏里科技大学的生物科学教授,20多年来每年都在微生物实验室任教。此前,该实验室使用三种不同的物种进行挑战,但总有一种物种在竞争中胜过其他物种。

当他发现从Addgene获得的色蛋白质粒时,他知道它将是一个完美的平板挑战。色素蛋白荧光蛋白是荧光蛋白家族的一个子集,在环境光下发出颜色。在大肠杆菌在挑战中很容易区分不同的殖民地。

创造一个成功的划线平板首先,将细菌接种在琼脂平板的一个象限上。然后,一根棍子被拖过第一条带并散布在第二象限。这个过程一直持续到所有象限都被使用,希望能在孵化后的最后象限发现单个的、孤立的菌落。

对学生来说,挑战通常是成功的。“它们总是得到一些孤立的殖民地。我可能应该让它更具有挑战性,可能会使用更厚的细菌悬液,”韦斯滕伯格说。

除了对单个菌落进行裸奔外,这些表达色素蛋白的菌株很容易被用于分子生物学的其他方面的其他实验。“我想对Addgene的质粒做的是让学生们把它们转化成不同的菌株E杆菌”,Westenberg说。在转换在实验中,他计划展示宿主菌株的不同遗传背景如何影响转化效率。

除了平板挑战,韦斯滕伯格的课程还包括Winogradsky柱和白蚁后肠微生物的特征。

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