2021年5月10日更新。
在荧光蛋白及其在细胞生物学成像中金宝搏app下载的应用领域,佛罗里达州立大学的迈克尔·戴维森实验室一直是首选之地。2012年,他的国家强磁场实验室与来自世界各地275多个机构的1350名科学家合作。在这么多年的合作中,他和他的同事建立了一个分子表达包括约3300个质粒还有图片库和教育资源。这个质粒集合可以在Addgene 's上以易于搜索的格式获得Michael Davidson荧光蛋白收集网页.
这些质粒分为以下几类:
- 超过300空的骨干在绿色、红色、黄色、青色、蓝色和橙色光谱中有100+不同的荧光团可供选择。
- 所有标记的细胞标记的综合列表mEmerald.
- 质粒通过多色标记和FRET监测蛋白-蛋白相互作用。
- 生物传感专业结构。
超过300个质粒骨架横跨彩虹荧光蛋白金宝搏app下载
“这是一个伟大的系列300多名骨干她一直在与戴维森的实验室成员合作,协调这个令人印象深刻的巨大矿床。“他拥有世界上所有的荧光蛋白,从标准的老派但好吃的(比如,EGFP和YFP)到新的和改进的水果颜色(如苹果、木瓜和西红柿)和photoactivatable萤石(如phhamret和Dendra)。这是一个如此丰富的收藏。”
在大多数情况下,脊骨可以将感兴趣的基因附着在n端或c端。米歇尔·贝尔德(Michelle Baird)解释说,即使研究人员感兴趣的基因不在ORF集合中,荧光蛋白却在,这使得混合和匹配成为一个相对容易的命金宝搏app下载题。过去四年里,贝尔德在戴维森实验室担任技术人员,一直在创造质粒。
贝尔德说:“如果还没有为研究人员制定目标,研究人员可以自己制定目标。”“它们都是设计在相同的载体骨干与非常相似的限制性内切酶。你基本上可以很快地剪切和粘贴。研究人员应该记住,非常简单的顺序或双限制性内切酶消化将为新的目标和荧光蛋白提供指数级的可能性。”金宝搏app下载
要了解更多关于选择主干和进行融合的信息,请参阅Joachim Goedhart的这篇博文:金宝搏app下载荧光蛋白101:GFP融合蛋白-建立正确的连接.
翡翠质粒和更多!
贝尔德有一个有用的建议,帮助那些想要仔细阅读这些收藏而不被其规模所压倒的人:看看mEmerald变体首先是颜色的变化。贝尔德说,mEmerald质粒提供了一份全面的现成目标清单,因为戴维森实验室总是先用mEmerald标记新的蛋白质。
从F-Actin到线粒体,从细胞核到细胞膜,这个集合有许多已知定位于特定细胞结构的蛋白质的荧光标记版本。戴维森实验室甚至包括了一些他们自己的参考图像,可以在相应的质粒页面上找到(例如,参见这里补充文件).如果你不确定你感兴趣的蛋白质在细胞中的位置,使用这些标记作为你的指南。
正如迈克尔·戴维森所说塔拉哈西的民主党人关于他生活的故事的工作和四期肺癌,已经促使他存款的工具与研究他和他的团队创造了社区,”(荧光蛋白)的一种全新的方式看到细胞生物学,看到什么与什么,什么影响。金宝搏app下载就像修玛莎拉蒂一样。如果我们知道所有零件是如何装配的,我们就能修理它。现在,我们还不知道。”
现在,即使戴维森实验室准备关门大吉,世界各地的科学家也会更容易对细胞内的世界有更清晰的了解。
Baird说:“我们希望将所有这些载体提供给科学界,并以一种人人都能利用我们的成果的方式做出贡献。”“它不会放在佛罗里达州立大学的冰箱里。迈克一直坚持要尽可能多地分配给研究人员,Addgene是我们做到这一点的绝佳载体。”在Addgene,我们同样很高兴能帮助戴维森实验室分享他们的试剂。Addgene的执行主任Joanne Kamens说:“我们很自豪能够将如此重要的藏品带给科学界,并宣传迈克尔·戴维森及其同事的伟大工作。”
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