由詹妮弗曾
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你花了数天甚至数周的时间来思考一个惊人的项目。你们已经写好了协议,设计了实验,准备了试剂。你将设计出自CRISPR以来最好的东西;你准备好克隆了!但是……如何?
这篇文章是由新英格兰生物实验室的生物化学研究员Greg Lohman的客座博主贡献的。什么时候需要高保真连接酶?什么时候替代连接酶是更好的选择?什么是连接酶保真度?我们来谈谈吧。DNA连接酶是一种酶…
本文由马里兰大学医学院教授、客座博主Iris Lindberg撰写。在林德伯格实验室,我们经常制造出过度表达感兴趣基因的细胞系;最近,我们也在使用Addgene CRISPR载体来生成细胞。
本文由新英格兰生物实验室的客座博主莉迪亚·莫里森贡献。什么是DNA组装?在克隆的背景下,DNA组装是指物理连接多个DNA片段,以创建一个综合设计的DNA序列的方法。有……
当面临克隆项目时,科学家们不再局限于传统的限制性内切酶克隆。相反,您可以选择一种分子克隆技术,它将在给定的资源、时间和实验需要下工作得很好。由于它的发明是在最近…
限制性内切酶克隆是分子克隆的主力军;然而,其最大的局限性之一是序列修饰只能在限制性内切酶切位点进行。lambda red系统是一种可用于克隆或基因组的替代方法…
如果您喜欢克隆,那么您可能知道目前有几种方法可以用于处理克隆。这些包括传统的酶/连接酶介导的方法,最近发展的Gibson Assembly克隆和Gateway®克隆…