马克斯·朱赫姆(Max Juchheim)著
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在Addgene,我们通常把质粒称为实验室或实验工具。它们在研究中确实非常方便,但这些工具从何而来,为什么它们在自然界中存在?继续读下去,了解更多关于环境质粒的知识,以及它们是如何帮助我们开发……
当面临克隆项目时,科学家们不再局限于传统的限制性内切酶克隆。相反,您可以选择一种分子克隆技术,它将在给定的资源、时间和实验需要下工作得很好。由于它的发明是在最近…
如果您喜欢克隆,那么您可能知道目前有几种方法可以用于处理克隆。这些包括传统的酶/连接酶介导的方法,最近发展的Gibson Assembly克隆和Gateway®克隆…
研究基因功能最有效的策略之一是用实验室设计的DNA片段取代或破坏基因,使其失活或“敲除”。特别构建的质粒可以用来替换酵母、老鼠或果蝇的基因……
拓扑异构酶基克隆(TOPO克隆)是一种不使用限制性内切酶或连接酶的DNA克隆方法,不需要pcr后程序。听起来很简单吧?该技术依赖互补碱基对腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)的基本能力。
您是否尝试过使用XbaI或cli限制性内切酶进行消化,并得到了不寻常或意想不到的结果?或者考虑过为什么DpnI会从PCR反应中降解你的模板DNA,而不是从位点定向诱变实验中新合成的产物?答案……
本文于2018年3月21日更新。大多数时候,质粒的制备是轻而易举的事。你从Addgene那里得到一针,单克隆,传代培养,然后用DNA准备工具或你实验室最喜欢的内部协议进行准备。这一过程的DNA产量通常在…